概要：动物细胞培养和核移植技术1.(2011年广州高二检测)用于动物细胞培养的细胞，最好选用()A.任何个体的细胞B.成熟个体的体细胞C.动物的受精卵D.胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞解析：选D。失去分裂能力的、高度分化的动物细胞是不能进行培养的;胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞分化程度低，分裂能力强，适于进行细胞培养。2.下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是()A.用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程B.从机体取得细胞后立即进行培养的过程C.出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程D.哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程解析：选B。原代培养是最初的细胞培养，即还没有分瓶培养前的细胞培养。3.动物细胞培养的特点是()①细胞贴壁②有丝分裂③分散生长④接触抑制⑤减数分裂A.①②④ B.②④⑤C.①③④ D.③④⑤解析：选A。动物细胞培养的过程是细胞有丝分裂的过程，在动物细胞培养的过程中存在细胞贴壁、接触抑制等特点，需要用胰蛋白酶处理，使细胞分散成单个。4.用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是()A.都需用CO2培养箱B.都须用液体培养基C.都要在无菌条件下进行D

动物细胞培养和核移植技术

1.(2011年广州高二检测)用于动物细胞培养的细胞，最好选用(　　)

A.任何个体的细胞

B.成熟个体的体细胞

C.动物的受精卵

D.胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞

解析：选D。失去分裂能力的、高度分化的动物细胞是不能进行培养的;胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞分化程度低，分裂能力强，适于进行细胞培养。

2.下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是(　　)

A.用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程

B.从机体取得细胞后立即进行培养的过程

C.出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程

D.哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程

解析：选B。原代培养是最初的细胞培养，即还没有分瓶培养前的细胞培养。

3.动物细胞培养的特点是(　　)

①细胞贴壁　②有丝分裂　③分散生长　④接触抑制

⑤减数分裂

A.①②④　　　　　　　　 B.②④⑤

C.①③④ D.③④⑤

解析：选A。动物细胞培养的过程是细胞有丝分裂的过程，在动物细胞培养的过程中存在细胞贴壁、接触抑制等特点，需要用胰蛋白酶处理，使细胞分散成单个。

4.用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是(　　)

A.都需用CO2培养箱

B.都须用液体培养基

C.都要在无菌条件下进行

D.都可体现细胞的全能性

解析：选C。用动、植物成体的体细胞进行离体培养都必须在无菌条件下进行。用植物成体的体细胞进行离体培养获得新个体体现的是细胞的全能性，而动物体细胞离体培养主要是获得细胞或其代谢产物。

5.乙马的卵细胞核被甲马的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂发育成重组胚胎，再植入丙马的子宫内发育，结果产下一只小马。下列叙述正确的是(　　)

A.直接在体外对甲马的体细胞进行诱导也能培养出胚胎来

B.小马的性状完全与甲马相同

C.此项技术可用于保护濒危物种

D.该过程可以很好地证明动物细胞的全能性

解析：选C。克隆过程中细胞质遗传物质来自一方，而细胞核中遗传物质来自另一方，所以小马的性状与甲马不完全一致，该过程只能说明动物细胞核具有全能性，而动物细胞全能性的体现目前还没成功。

6.(2011年广东汕头高二检测)

如图所示为动物细胞培养的基本过程示意图，请据此图回答下列问题。

(1)容器A中放置的是动物器官或组织，它一般取自____________________________________________________________

___________________________________________________________。

(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是________，然后用________酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是________________________________________________________________________。

(3)培育首先在B瓶中进行，瓶中的培养基成分有________________________________等。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，这时培养到________代，到此时的培养称为________________。

(4)为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用________处理，然后配置成________，再分装。

(5)在C瓶中正常培养了一段时间后，发现细胞全部死亡，原因是____________________。

解析：(1)培养的动物细胞一般取自动物胚胎或幼龄动物的器官或组织的原因是这部分细胞的分化程度低，增殖能力强，更易于培养。(2)在进行培养时应尽量分散成单个细胞，便于与培养液充分接触进行物质交换，使其分散需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。(3)动物细胞培养过程中尽量使培养基成分与体内基本相同，所以需要添加糖、氨基酸、无机盐、动物血清、促生长因子和微量元素等。培养的过程分为原代培养和传代培养两大阶段，当培养到第10代左右，出现许多细胞衰老死亡的现象，这时的培养为原代培养。(4)到第10代左右需要用胰蛋白酶处理，使细胞分散，从玻璃瓶壁上脱离下来，配制成细胞悬浮液继续培养。(5)在C瓶中的培养属于传代培养，在传代培养过程中到第10～50代细胞死亡，有些细胞可能发生遗传物质的改变能继续增殖即发生癌变。如果无此现象则说明细胞遗传物质没有改变，无癌变的特点。

答案：(1)动物胚胎或幼龄动物的器官或组织

(2)剪碎　胰蛋白　使细胞与培养液充分接触

(3)糖、氨基酸、无机盐、动物血清、促生长因子和微量元素　10　原代培养

(4)胰蛋白酶　细胞悬浮液

(5)细胞没有发生癌变

(紧扣教材，思考感悟)

【旁栏思考】

1.进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?(教材P44)

答案：用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适合用于细胞培养时的消化。

2.为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清?(教材P46)

答案：血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成(称为必需氨基酸)，必须由培养液提供。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子(如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等)，血清中还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此，细胞培养时要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%～20%的血清。

【寻根问底】

胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?(教材P44)

答案：胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶作用的时间。

1.动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是(　　)

A.动物细胞培养　　　　　　 B.动物细胞融合

C.单克隆抗体 D.胚胎细胞核移植

答案：A

2.动物细胞培养过程的顺序是 (　　)

①原代培养　②传代培养　③用胰蛋白酶处理组织，形成分散的细胞悬液

A.①②③ B.①③②

C.②①③ D.③①②

答案：D

3.(2011年北京西城区高二检测)下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是(　　)

A.动物细胞培养的目的就是为获得细胞分泌蛋白

B.动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散开

C.动物细胞培养通常不会出现接触抑制现象

D.可以通过细胞培养技术获得完整的动物个体

答案：B

4.一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件(　　)

①无毒的环境　②无菌的环境　③合成培养基需加血浆

④温度与动物体温相近　⑤需要O2，不需要CO2 　⑥CO2能调节培养液pH

A.①②③④⑤⑥ B.①②③④

C.①③④⑤⑥ D.①②③④⑥

解析：选D。一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件：无菌、无毒的环境，与体内培养相同的营养，适宜的温度和pH，还要有适量的CO2。

5.在动物细胞培养过程中，出现遗传物质改变的细胞是(　　)

A.细胞系 B.细胞株

C.原代细胞 D.传代细胞

解析：选A。细胞株是一些分裂能力较强的正常细胞，其遗传物质没有发生变化;而细胞系则是一些具有癌变特征的细胞，具有无限增殖的能力。

6.动物细胞培养技术的用途有(　　)

①生产有价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素等　②生产基因工程技术中所用的受体细胞　③可以用于检测有毒物质　④培养的各种细胞可直接用于生理、病理、药理等方面的研究

A.①② B.①②③

C.②③④ D.①②③④

解析：选D。通过动物细胞培养可以生产生物制品如病毒疫苗、干扰素等，可以培养皮肤移植的材料，还可以检测有毒物质，用于生理、病理、药理等方面的研究。

7.动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。下列从该图提供的信息获得的结论中不正确的是(　　)

A.正常细胞与癌细胞的增殖速率相同

B.有无血清对正常细胞与癌细胞培养的影响不同

C.培养基中补充血清有助于正常细胞的培养

D.培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大

解析：选A。动物细胞培养时通常要在培养基中加入血清、血浆等物质。从图示中可看出癌细胞与正常细胞的增殖速率不同。有血清时正常细胞增殖快。而有无血清对癌细胞的培养影响不大。

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